Flere enzymer, der almindeligvis anvendes i PCR-forsøg

Polymerase kædereaktion, forkortet somPCRpå engelsk, er en molekylærbiologisk teknik, der bruges til at amplificere specifikke DNA-fragmenter.Det kan betragtes som en særlig DNA-replikation uden for kroppen, som i høj grad kan øge en meget lille mængde DNA.Under helePCRreaktionsprocessen spiller en klasse af stoffer en afgørende rolle - enzymer.

1. Taq DNA

I eksperimenter i de tidlige dage afPCR, videnskabsmænd brugte Escherichia coli DNA-polymerase I, Men der er et problem med dette enzym: det skal genopfylde nyt enzym hver gang en cyklus udføres, hvilket gør operationstrinnene lidt komplicerede, og det er svært at amplificere helt automatisk.Dette problem blev løst, efter at forskere ved et uheld isolerede Taq DNA-polymerase fra Thermus aquaticus i 1988. Siden da er den automatiske amplifikation af DNA blevet en realitet.Opdagelsen af ​​dette enzym gør ogsåPCRteknologi en bekvem, praktisk og universel teknologi.I øjeblikket er Taq DNA-polymerase den mest almindelige polymerase i DNA-sæt.

2. PfuDNA

Som nævnt ovenfor har Taq DNase en stor fejl, så videnskabsmænd har modificeret Taq DNA-polymerase til en vis grad for at undgå uspecifik amplifikation på grund af mismatching, hvilket resulterer i unøjagtige testresultater.Men modifikationen af ​​Taq DNA-polymerase kan hæmme aktiviteten af ​​DNA-polymerase ved stuetemperatur.PfuDNA-polymerase kan godt kompensere for de ovennævnte ulemper ved Taq DNA-polymerase, således at PCR-reaktionen kan udføres normalt, og succesraten for målgenamplifikation kan forbedres effektivt.

3. Omvendt transkriptase

Revers transkriptase blev opdaget i 1970. Dette enzym bruger RNA som skabelon, dNTP som substrat, følger princippet om baseparring og syntetiserer en enkelt DNA-streng komplementær til RNA-skabelonen i 5'-3'-retningen.Revers transkriptase er primært afhængig af DNA-polymeraseaktivitet fra DNA- eller RNA-skabeloner og har derfor ingen 3'-5' exonukleaseaktivitet.Det har imidlertid RNase H-aktivitet, hvilket begrænser synteselængden af ​​revers transkriptase til en vis grad.På grund af den lave troskab og termostabilitet af vild revers transkriptase, modificerede videnskabsmænd det også.

TilPCReksperimenter er de vigtigste forbrugsstoffer: individuelt PCR-rør, 4/8-strimmel PCR-rør, PCR-plader.

LabiosPCR forbrugsstofferhar følgendefordele:

PCR plader: Bred termisk cyklerkompatibilitet;Høj kontrast, nem brøndidentifikation;godt fluorescens refleksion; godvarmeoverførsel;Certificeret DNase, RNase, DNA, PCR-hæmmere og testet pyrogenfri.

Individuelle PCR-rør: Fordampningsbestandig; godvarmeoverførsel;fremragende optisk klarhed; Certificeret DNase, RNase, DNA, PCR-hæmmere og testet pyrogenfri.

4/8-strips PCR-rør: Ultratynde vægge; høj klarhed; god fluorescensrefleksion;kan bruges i den farmaceutiske industri, fødevareindustrien og molekylærbiologi; højkvalitets, jomfruelig PP-materiale; Certificeret DNase, RNase, DNA, PCR-hæmmere og testet pyrogenfri.