Et centrifugerør er et simpelt rør, der kan modstå høj rotationshastighed og tryk, såsom adskillelse af nogle prøver og adskillelse af supernatant sedimenter.Ultrafiltreringscentrifugerøret har to dele, der ligner det indre rør og det ydre rør.Det indre rør er en membran med en vis molekylvægt.Under højhastighedscentrifugering vil dem med en mindre molekylvægt lække ind i det nederste rør (dvs. det ydre rør), og dem med en større molekylvægt vil blive fanget i det øvre rør (dvs. det indre rør).Dette er princippet om ultrafiltrering og bruges ofte til at koncentrere prøver.
Ultrafiltreringscentrifugerør kan normalt bruges uden forbehandling, men til proteinprøvebehandling, især til fortyndede proteinopløsninger (< 10 ug/ml), er genvindingshastigheden for koncentration med ultrafiltreringsmembraner ofte ikke kvantitativ.Selvom PES-materialer minimerer uspecifik adsorption, kan nogle proteiner, især når de er fortyndede, have problemer.Graden af uspecifik binding varierer med strukturen af individuelle proteiner.Proteiner indeholdende ladede eller hydrofobe domæner er mere tilbøjelige til at binde irreversibelt til forskellige overflader.Passiveringsforbehandling på overfladen af ultrafiltreringscentrifugerøret kan reducere tabet af proteinadsorption på membranoverfladen.I de fleste tilfælde kan forbehandling af søjlen før koncentrering af den fortyndede proteinopløsning forbedre genvindingshastigheden, fordi opløsningen kan udfylde de blanke proteinadsorptionssteder, der er eksponeret på membranen og overfladen.Passiveringsmetoden er at gennembløde kolonnen med et større volumen passiveringsopløsning i mere end 1 time, vaske kolonnen grundigt med destilleret vand og derefter centrifugere den én gang med destilleret vand for fuldstændigt at fjerne passiveringsopløsningen, der kan forblive på filmen. .Pas på ikke at lade filmen tørre efter passivering.Hvis du vil bruge det senere, skal du tilføje sterilt destilleret vand for at holde filmen fugtig.
Ultrafiltreringscentrifugerør kan normalt ikke steriliseres og genbruges.Da prisen på et enkelt rør ikke er billig, forsøger mange at genbruge det – erfaringen er at rense membranoverfladen med destilleret vand i mange gange og centrifugere den en eller to gange.Det lille rør, der kan centrifugeres omvendt, kan nedsænkes i destilleret vand og derefter centrifugeres omvendt i flere gange, hvilket vil være bedre.Den kan bruges til den samme prøve gentagne gange og kan lægges i blød i destilleret vand, når den ikke er i brug, men bakteriel kontaminering skal forhindres.Bland ikke forskellige prøver.Nogle mennesker siger, at opblødning i 20% alkohol og 1n NaOH (natriumhydroxid) kan forhindre vækst af bakterier og forhindre udtørring.Så længe ultrafiltreringsmembranen invaderer vand, kan den ikke få lov til at tørre.Andre siger dog, at det vil ødelægge membranstrukturen.Under alle omstændigheder understøtter producenter generelt ikke genbrug.Gentagen brug vil blokere filtermembranens porestørrelse og endda forårsage væskelækage, hvilket vil påvirke de eksperimentelle resultater.
Indlægstid: 05-05-2022